(Yongjian Wu, Cheng Guo, Lantian Tang, Zhongsi Hong, Jianhui Zhou, Xin Dong, et al.) Apresentamos os resultados de RT-PCR em tempo real da síndrome respiratória aguda grave (SARS-CoV-2) de todas as amostras respiratórias e fecais de pacientes com doença de coronavírus 2019 (COVID-19) no Quinto Hospital Afiliado da Universidade Sun Yat-sen , Zhuhai, China, durante todo o curso de sua doença e período de quarentena obrigatório. Utilizou-se RT-PCR em tempo real para detectar COVID-19 seguindo o protocolo recomendado ( apêndice p 1) Pacientes com suspeita de SARS-CoV-2 foram confirmados após dois resultados seqüenciais positivos da amostra do trato respiratório. As amostras respiratórias e fecais foram coletadas a cada 1-2 dias (dependendo da disponibilidade de amostras fecais) até que dois resultados negativos seqüenciais fossem obtidos. Analisamos as informações demográficas dos pacientes, doenças subjacentes, índices clínicos e tratamentos a partir de seus registros médicos oficiais. O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética Médica do Quinto Hospital Afiliado da Universidade Sun Yat-sen (número de aprovação K162-1) e o consentimento informado foi obtido dos participantes. Notavelmente, os pacientes que atenderam aos critérios de alta tiveram permissão para permanecer no hospital para observação prolongada e cuidados de saúde.
Entre 16 de janeiro e 15 de março de 2020, registramos 98 pacientes. Amostras respiratórias e fecais foram coletadas de 74 (76%) pacientes. As amostras fecais de 33 (45%) dos 74 pacientes foram negativas para o RNA da SARS CoV-2, enquanto os swabs respiratórios permaneceram positivos por uma média de 15,4 dias (DP 6,7) desde o primeiro sintoma. Dos 41 (55%) dos 74 pacientes com amostras fecais positivas para o RNA da SARS-CoV-2, as amostras respiratórias permaneceram positivas para o RNA da SARS-CoV-2 por uma média de 16,7 dias (DP 6,7) e as amostras fecais permaneceram positivas por uma média de 27,9 dias (10,7) após o início dos primeiros sintomas (ou seja, por uma média de 11,2 dias [9,2] mais do que nas amostras respiratórias). O curso completo da doença dos 41 pacientes com amostras fecais positivas para o RNA da SARS-CoV-2 é mostrado na figura. Notavelmente, o paciente 1 teve amostras fecais positivas por 33 dias continuamente após as amostras respiratórias se tornarem negativas e o paciente 4 testou positivo para RNA SARS-CoV-2 em sua amostra fecal por 47 dias após o início dos primeiros sintomas ( apêndice pp 4-5 ).
Um resumo dos sintomas clínicos e tratamentos médicos é mostrado no apêndice (pp 2–3, 6–8) . A presença de sintomas gastrointestinais não foi associada à positividade do RNA viral da amostra fecal (p = 0,45); a gravidade da doença não foi associada à duração prolongada da positividade do RNA viral da amostra fecal (p = 0,60); no entanto, o tratamento antiviral foi associado positivamente à presença de RNA viral nas amostras fecais (p = 0,025; apêndice pp 2-3 ). Essas associações devem ser interpretadas com cautela devido à possibilidade de confusão. Além disso, os valores de Ct dos três genes alvo ( RdRp, N, E) na primeira amostra fecal positiva para RNA viral foram negativamente associados à duração da positividade do RNA viral fecal ( gene RdRp r = –0,34; gene N r = –0,02; e gene E r = –0 · 16), enquanto que a correlação dos valores de Ct com a duração da positividade da amostra fecal foi significativa apenas para RdRp (p = 0,033; gene N p = 0,91; gene E p = 0,33).
Nossos dados sugerem a possibilidade de duração prolongada do derramamento viral nas fezes, por quase 5 semanas após as amostras respiratórias dos pacientes terem resultado negativo para o RNA SARS-CoV-2. Embora o conhecimento sobre a viabilidade do SARS-CoV-2 seja limitado,1 o vírus pode permanecer viável no ambiente por dias, o que pode levar à transmissão fecal-oral, como observado no vírus respiratório agudo grave CoV e na síndrome respiratória do Oriente Médio CoV.2Portanto, o teste de rotina das amostras de fezes com RT-PCR em tempo real é altamente recomendado após a liberação do RNA viral nas amostras respiratórias de um paciente. Devem ser tomadas precauções rigorosas para impedir a transmissão em pacientes internados ou em quarentena, se suas amostras fecais apresentarem resultados positivos.
Como em qualquer nova doença infecciosa, a definição de caso evolui rapidamente à medida que o conhecimento da doença aumenta. Nossos dados sugerem que a positividade da amostra fecal para o RNA SARS-CoV-2 fica normalmente atrás da das amostras do trato respiratório; portanto, não sugerimos a adição de testes de amostras fecais aos procedimentos de diagnóstico existentes para o COVID-19. No entanto, a decisão sobre quando interromper as precauções para impedir a transmissão em pacientes que se recuperaram do COVID-19 é crucial para o gerenciamento de recursos médicos. Sugerimos a adição de testes fecais para SARS-CoV-2.3Atualmente, a decisão de dar alta a um paciente é tomada se eles não apresentarem sintomas relevantes e pelo menos dois resultados negativos sequenciais por RT-PCR em tempo real de amostras de escarro ou trato respiratório coletadas com mais de 24 horas de intervalo. Aqui, observamos que em mais da metade dos pacientes, suas amostras fecais permaneceram positivas para o RNA da SARS-CoV-2 por uma média de 11,2 dias após as amostras do trato respiratório se tornarem negativas para o RNA da SARS-CoV-2, implicando que o vírus está infectado. replicar ativamente no trato gastrointestinal do paciente e que a transmissão fecal-oral pode ocorrer após a liberação viral no trato respiratório.
Determinar se um vírus é viável usando a detecção de ácido nucleico é difícil; mais pesquisas usando amostras de fezes frescas em momentos posteriores em pacientes com duração prolongada da positividade da amostra fecal são necessárias para definir o potencial de transmissão. Além disso, descobrimos que os pacientes normalmente não apresentavam sintomas muito ou pouco leves após os resultados da amostra do trato respiratório se tornarem negativos (dados não mostrados); no entanto, transmissão assintomática foi relatada.4Ainda não foram relatados casos de transmissão por via fecal-oral para o SARS-CoV-2, o que pode sugerir que a infecção por essa via é improvável em instalações de quarentena, no hospital ou em isolamento. No entanto, a transmissão fecal-oral em potencial pode representar um risco aumentado em instalações residenciais, como albergues, dormitórios, trens, ônibus e navios de cruzeiro.
A transmissão respiratória ainda é a principal via para SARS-CoV-2 e as evidências ainda não são suficientes para desenvolver medidas práticas para o grupo de pacientes com resultados negativos da amostra do trato respiratório, mas amostras fecais positivas. É necessária mais investigação sobre a viabilidade e infecciosidade do SARS-CoV-2 nas fezes.
Declaramos não haver interesses concorrentes. Este trabalho foi financiado por doações dos principais projetos nacionais de ciência e tecnologia para doenças infecciosas graves (2017ZX10302301-002), da Fundação Nacional de Ciências Naturais da China (31470877), do projeto de planejamento de ciência e tecnologia de Guangzhou (201704020226 e 201604020006), da Guangdong Natural Science Foundation ( 2015A030311009) e Programa Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Chave da China (2016YFC1200105). YW, CG e LT contribuíram igualmente. HS, GJ e XH são autores sênior conjuntos.
Referências
1) Goh GK-M Dunker AK Foster JA Uversky VN
A rigidez da camada externa prevista por um modelo de desordem intrínseca protéica lança luz sobre a infectividade do COVID-19 (Wuhan-2019-nCoV).
Biomoléculas. 2020; 10 : e331
2)Yeo C Kaushal S Yeo D
Envolvimento entérico dos coronavírus: é possível a transmissão fecal-oral da SARS-CoV-2 ?.
Lancet Gastroenterol Hepatol. 2020;( publicado online em 19 de fevereiro )
https://doi.org/10.1016/S2468-1253(20)30048-0
3)Munster VJ Koopmans M van Doremalen N van Riel D de Wit E
Um novo coronavírus emergente na China - questões-chave para avaliação de impacto.
N Engl J Med. 2020; 382 : 692-694
4)Bai Y Yao L Wei T et al.
Presumida transmissão portadora assintomática de COVID-19.
JAMA. 2020;( publicado online em 21 de fevereiro )
Tradução: Google Translate
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